Western blot

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蛋白质印记(western blot)又称免疫印迹(immunoblotting),是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,并且通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术,常用于鉴定蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。

技术路线

Western blot技术流程


技术优势

  • 高分辨率的电泳技术:聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel,PAGE)把分子筛作用和电荷效应结合在同一方法中,达到更高的灵敏度。
  • 特异敏感的抗原-抗体反应:抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原与抗体的结合具有高度的特异性。
  • 1-5ng中等大小的靶蛋白:可检测到低至1~5ng(最低可到10~100pg)中等大小的靶蛋白。