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CRlSPR/Cas9技术是基因编辑历史上的又一里程碑。该技术通过gRNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰。gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具,gRNA文库的建立将在功能基因筛选、疾病机制研究及药物研发等方面发挥重要的功能。

安必奇生物可为客户定制针对特定基因分类的。我们提供的gRNA文库包括:全基因组文库、 lncRNA 文库、信号通路、细胞凋亡、细胞增殖、离子通道、核受体相关、各种疾病相关等文库。除了可以提供Plasmid –gRNA Library以外,还可以根据客户需要对gRNA文库进行病毒包装,最终以Packaged Viral -gRNA Library形式提交。我们选择的基因靶点经过多个交互数据库筛查,设计的gRNA均经过敲除效率验证。我们一流的技术平台和经验丰富的专家会为您提供快速可靠的gRNA文库构建服务,最终交付给您转染级别的文库,可直接用于高通量药物靶点以及功能基因的筛选。

全基因组gRNA文库的构建

安必奇生物的全基因组gRNA文库的构建可以针对任何类型的基因组DNA,包括ORF cDNA,lncRNA cDNA以及特定区域的cDNA片段等。能够针对全长cDNA乃至基因组DNA构建高效的gRNA文库,适用于高通量功能基因及相关药物靶点筛选。

客户定制gRNA文库

安必奇生物提供的自定义文库有:各种信号通路相关基因的gRNA文库以及疾病相关基因的gRNA文库。根据客户确定的研究通路或疾病,筛选相关的靶基因。我们为客户分别设计这些靶基因的gRNA序列并构建gRNA library。

技术流程
  • 1. 客户提供靶基因/靶序列信息;
  • 2. 我们进行gRNA文库构建,抽样测序验证;
  • 3. 根据客户要求,构建gRNA表达质粒文库,以Plasmid –gRNA Library形式提交;
  • 4. 根据客户需要,对gRNA文库进行病毒包装,最终以Packaged Viral -gRNA Library形式提交;
  • 5. 将其连同抽样报告、产品说明书一起寄送到客户手中。
我们的优势
  • gRNA自主设计及载体构建技术,具有更高效率、更低成本优势;
  • 结合慢病毒包装系统,可用与各种难转染的细胞,如原代细胞或神经元细胞等;
  • 流式细胞、免疫荧光等多种分选方法,便于后期细胞筛选。
  • 为客户提供从gRNA文库设计、合成、载体构建、慢病毒包装到细胞分选的整体服务。
应用领域
  • 用于通路或疾病相关基因的筛选[1];
  • 高通量功能基因筛选[2];
  • 药物靶点筛选[3]。
参考文献
[1] Noorani I. 140 Genome-wide CRISPR/cas9 Knockout Screens in Human Glioblastoma Identify Genetic Vulnerabilities[J]. Neurosurgery, 2016, 63: 157.
[2] Zhu S, Li W, Liu J, et al. Genome-scale deletion screening of human long non-coding RNAs using a paired-guide RNA CRISPR-Cas9 library[J]. Nature Biotechnology, 2016.
[3] Shalem O, Sanjana N E, Hartenian E, et al. Genome-scale CRISPR-Cas9 knockout screening in human cells[J]. Science, 2014, 343(6166): 84-87.

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