背景介绍
杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达系统是常用的蛋白表达系统之一,是真核环境中高效表达外源蛋白的有利工具。该系统通过利用杆状病毒寄生在昆虫细胞系中实现外源蛋白的大量表达。该系统有着真核系统的传统优势,也兼具原核表达系统的高效表达的特点,能够实现在同一载体上进行不同种蛋白的表达。昆虫细胞表达系统还具有翻译后修饰的功能,尤其适用于对哺乳动物细胞产生毒性的蛋白的表达,通过昆虫细胞表达系统生产的重组蛋白可用于疫苗生产,基因治疗,杀虫剂等方面。
安必奇生物拥有专业的杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达技术团队,凭借着丰富的项目经验,我们能够在昆虫细胞表达系统中轻松实现多种在其它系统中不利于表达的蛋白的表达,例如:长序列蛋白,病毒类蛋白,膜蛋白,胞内蛋白,毒蛋白等多种疑难杂症蛋白。我们不仅能够提供可选择的表达载体,还有着优化后实现高滴度的病毒包装技术,通过对具体蛋白进行具体分析,提供定制化的一站式服务。
服务优势
高表达水平:我们的昆虫表达系统可实现重组蛋白的高表达。
可选择的多种表达载体
高滴度的病毒包装技术
丰富的项目经验:已经成功表达多个疑难杂症蛋白。
服务内容和流程
实验流程 | 实验内容 | 交付结果 | 周期 |
密码子优化+基因合成 | 我们会对目的序列进行密码子优化,并且针对于特定功能的motif、重复序列、GC含量以及mRNA的二级结构等综合考虑优化 | 优化序列 | 6-10周 |
载体构建 | 根据载体的多克隆位点选做合适的酶切位点,按照读码框插入待表达的目的基因序列。最后通过测序验证插入序列是否正确 | 载体图谱 | |
病毒包装、扩增及转染 | 重组杆状病毒转染昆虫细胞,测定病毒滴度。为增加表达可以选做P2代杆状病毒的扩增 | ||
大规模表达 | 安必奇生物拥有多种细胞株进行的蛋白大规模表达,根据不同类型的蛋白而进行选择 | ||
蛋白纯化 | 安必奇生物拥有先进的AKTA purifier系统和全套预装的离子柱、分子筛、疏水柱及亲和层析柱,会根据不同的项目选择适合的纯化方法 | 目的蛋白 | |
目的蛋白质检 | 利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定 | 检测结果 | |
最终交付 | 根据客户需求,提供蛋白冻干等服务 | 目的蛋白及实验报告 |