服务类型
CRISPR/Cas9基因敲除
服务种类：条件性、完全性敲除小鼠；单基因、多基因敲除细胞系；miRNA/lncRNA敲除细胞系；目的、报告基因敲入细胞系；基因定点突变细胞系
建议原则与流程：
1、设计、构建gRNA质粒和含有突变位点信息的donor vector，将以上质粒转录为mRNA后，与Cas9 mRNA一起原核显微注射获得测序鉴定阳性的F0代杂合子鼠；
2、F0代杂合子鼠与野生型鼠进行交配，获得PCR和测序鉴定阳性的F1代杂合子鼠；性的F0代杂合子鼠；
3、达到性成熟后进行同胞交配，获得F2代鼠。对获得的F2代鼠进行PCR及测序鉴定。
转基因生物
技术原理：
构建转基因载体，通常需要包含启动子、表达片段（microRNA或CDS）及polyA，还可以包含一些额外的元件，如：loxP-STOP-loxP, insulator等
通过酶切去除原核载体骨架，将回收纯化好的转基因片段注射到小鼠受精卵，转基因片段随机整合到小鼠基因组中，将注射后的受精卵移植到假孕受体雌鼠子宫，受体雌鼠会生下founder鼠
通过tail DNA PCR鉴定出整合了转基因片段的founder，将founder与野生型小鼠交配，可以得到更多的后代用于表达分析
服务优势：
1.成功率较高。
2.可进行后续服务，如：代理繁育，表型分析等。
3.转基因片段通常以多拷贝串连的方式插入，可以得到高拷贝的转基因小鼠。
4.一次注射就可能得到高、中、低表达水平不同的转基因品系。
我们的优势
高速度：快则2个月即可得到F0代阳性鼠,5个月得到F1代阳性鼠。
低风险：生产平台支持。
高效率：比现有的CRISPR/Cas9介导的基因重组效率有所提高。
高质量：坚持Southern blot检测，降低随机插入造成后续实验风险。
多样化：全基因敲除、条件性基因敲除、基因敲入等。
物种限制少：细胞系，小鼠，大鼠，猪，猴，斑马鱼
