凝胶阻滞迁移电泳检测服务(EMSA)

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凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA/RNA结合蛋白和其相关的DNA/RNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。依据实验需要,设计标记探针、非标记探针、蛋白特异性抗体等参照物,基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理,当转录因子与特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。

安必奇生物提供的EMSA实验,基于生物素标记探针与对应的DNA结合蛋白的特异性结合,设计合理、科学的实验方案,为客户提供验证性的EMSA,竞争性的EMSA以及超迁移EMSA(Super-shift EMSA)实验服务。

EMSA凝胶阻滞迁移电泳检测原理图
EMSA凝胶阻滞迁移电泳检测原理图
服务内容
服务内容 项目说明
验证性EMSA 验证生物素标记探针与结合蛋白互作的EMSA
竞争性EMSA  生物素标记探针、非标记探针与结合蛋白互作的EMSA
超迁移EMSA 特异性抗体进一步鉴定探针与蛋白结合物的EMSA
技术流程
技术流程 说明 周期
探针设计合成 客户提供结合基因序列或参考文献来分析设计合成 1-2周
标准蛋白样品制备与定量 蛋白标准样品的制备与浓度精确测定,蛋白样品制备要现配现用 1周
EMSA 凝胶电泳迁移检测 泳道设定及浓度梯度实验设计 1周
结合蛋白的纯化与质谱检测(未知蛋白需要检测) 蛋白纯化,质谱检测进行肽段检索与聚类分析 1-2周
客户需准备的材料
• 细胞(>2*107)或细胞核蛋白或纯化的转录因子,部分实验亦可使用重组表达的蛋白;
• 目的蛋白一抗及相关试剂盒;
• 探针序列或预测核酸作用基因序列;
• 阳性对照样品。
实验报告内容
• 探针设计合成信息;
• 原始数据、结果图片;
• 完整的实验报告(含实验步骤、流程)。

核酸与蛋白互作研究订单表

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