微生物基因组改造

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一些微生物被广泛应用于工业发酵,生产乙醇、食品及各种酶制剂等。对工业微生物开展的基因组研究,不断发现新的特殊酶基因及重要代谢过程和代谢产物生成相关的功能基因,可以将其应用于生产以及传统工业、工艺的改造,同时推动现代生物技术的迅速发展。

安必奇生物推出基于Rec同源重组法的微生物基因组改造服务和利用CRISPR/Cas9平台的微生物基因组改造服务。

基于Rec同源重组法的微生物基因组改造服务和利用CRISPR/Cas9平台的微生物基因组改造服务
基于Rec同源重组法的微生物基因组改造服务

细菌基因敲除的传统方法是利用自身的Rec系统对外源进入的DNA进行同源重组,从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段,将其克隆至自杀载体中,自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下,只有细菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒的细菌才可以存活。最后通过PCR鉴定即可获得目的基因的缺失突变株。

研究对象

革兰氏阴性细菌,少部分革兰氏阳性菌。如大肠杆菌、链霉菌、分枝杆菌、白色念珠菌等。

利用CRISPR/Cas9平台的微生物基因组改造服务[1]

自然界中的微生物总是通过各种各样的保护机制,使它们能够与恶劣的环境及侵袭性核酸共存。许多微生物都能通过基于基因序列特异性的方式抵抗核酸入侵。CRISPR/Cas9即是属于这种保护机制之一。在此背景下,安必奇生物科技推出CRISPR方法进行微生物的基因组改造服务(包括基因敲除、定点突变、定点插入外源序列等)。相比于传统的基因敲除方法,该方法速度快,无痕;非常便于后续的实验研究。

研究对象

大肠杆菌、沙门氏菌、链霉菌、梭菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、丝状真菌等。

服务优势
• 无痕编辑
• 高效精确
• 多基因编辑:能同时敲除多达3个基因
• 便于筛选:不要求靶细菌具有抗生素抗性
• 定制服务:公司可以代为开发针对该物种的CRISPR基因组编辑系统或利用常规同源重组方法的基因组编辑系统
客户提供信息
• 需改造的菌株及信息
• 靶基因的名称或靶序列
下游应用
• 抗生素及重要工业用酶
• 微生态调节剂参与食品发酵的工业化生产

[1] Selle K, Barrangou R. Harnessing CRISPR–Cas systems for bacterial genome editing[J]. Trends in microbiology, 2015, 23(4): 225-232.

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