Knockdown(基因敲低)细胞系服务

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RNA干扰是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。现今发现的主要起干扰作用的主要有两类小分子RNA:一类是microRNA;另一类是siRNA。siRNA制备的方法一般有:化学合成siRNA,哺乳动物细胞载体shRNA克隆和慢病毒载体shRNA克隆。shRNA需通过载体导入细胞后,然后利用细胞内的酶切机制得到siRNA而最终发挥 RNA干扰作用。

在细胞水平上,利用RNA干扰技术来抑制目标基因的表达,从而获得knockdown的基因敲低细胞系,已广泛应用于研究基因功能,设计疾病模型和药物研发中。安必奇凭借先进的实验技术,完善的实验平台可以针对各种目标基因设计高效的shRNA,并利用shRNA的慢病毒表达载体,构建种类齐全的各种基因knockdown稳定细胞系。
安必奇生物科技提供的knockdown基因敲低细胞系服务不受基因位点、细胞种类的限制,可以在任何基因、任何位点、各种哺乳细胞上实现基因敲低。我们最终会提供给客户高质、稳定的细胞系以及全面的检测报告,包括mRNA水平、蛋白质水平、细胞表型水平检测报告。 Knockdown(基因敲低)细胞系服务

技术流程 Knockdown(基因敲低)细胞系服务 服务内容
  • 筛选有效的shRNA- 针对靶基因设计和筛选作用高效的shRNA。
  • shRNA表达载体构建- 将shRNA克隆入慢病毒载体。
  • 细胞转导和克隆筛选- 由慢病毒介导的shRNA表达载体,可以感染各种细胞,甚至是难转染的细胞。我们已经在H1299、2F-2B、4T1、786-O、9607、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、CHO、HepG2 等多个种属细胞中成功构建了knockdown的稳定细胞系。
  • 鉴定- 全面可靠的检测报告,如qRT-PCR 、 Western blot 等检测报告。
我们的优势
  • 无基因序列、细胞、物种限制,几乎可敲低任意基因。
  • 实验设计简单准确、实验周期短、成本低。
  • 毒性低、脱靶情况少;成功率几乎可达100%。
  • 可识别任意目标基因序列,且不受上下游序列影响。
  • lentivirus-shRNA经过慢病毒包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
应用领域
  • 研究基因功能和调控机制。
  • 设计疾病模型,用于研究疾病的诊断治疗方法。
  • 应用于生物制药研究领域,开发筛选DNA疫苗、重组抗体和药物。