兔单克隆抗体制备服务

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与其他公司采用杂交瘤技术生产兔单克隆抗体的技术不同,Creative Biolabs公司基于公司国际领先的噬菌体展示技术平台,构建了独特的兔单克隆抗体研发平台。北京安必奇生物是Creative Biolabs公司在中国的唯一代理商,可以为国内客户提供专业的兔单克隆抗体制备服务。

兔单克隆抗体制备服务

兔抗体库是兔源多克隆抗体和单克隆抗体非常优质的来源,产生的抗体拥有高特异性、高活性和高亲和力的优点。因为兔和啮齿类动物中常用的大鼠、小鼠进化关系较远,啮齿类单克隆抗体(以及从转入了人体免疫球蛋白基因的转基因小鼠中制备的人单克隆抗体)对啮齿类和人体抗原共同的抗原决定簇不起作用,而兔抗体却往往可以很好的辨识啮齿类和人体抗原共同抗原决定簇,克服了抗体生产中这一障碍。噬菌体展示技术对表形(蛋白质)和基因型(cDNA)同时进行筛选,因而由此法制备的兔单克隆抗体具有更多的优势。此外,和兔杂交瘤技术相比,我们公司的噬菌体展示平台可以同时生产更多数量的单克隆抗体。

噬菌体展示系统是在大肠杆菌中实现的,而兔Fab抗体片段对大肠杆菌却是有毒性的。通常有两种方法可以避免兔Fab抗体片段在细菌细胞中表达的毒性、不溶性以及表达量低的问题。一是链接兔源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH) 和人源抗体恒定区(Ck and CH1),以此来制造兔人嵌合Fab抗体库。Carlos F. Barbas III 和 Christoph Rader博士的研究充分证明这种方法是有效的。另一种方法是利用酵母展示技术在酵母Pichia pastoris中表达特定的兔源Fab(或scFv)抗体,我们公司目前并不使用这种方法。

值得注意的是,小鼠以及人的k 轻链都具有两个链内二硫键,而大多数兔源抗体除此之外还有另一个连接可变区和恒定区的二硫键。科学家在研究这条多出来的二硫键在兔/人嵌合Fab库的建造和筛选中的作用时发现,具有bas突变以及野生亲本b9这两个异型都是制备兔源单克隆抗体的绝佳来源。

Creative Biolabs公司已经为来自全球的客户构建了多个兔免疫抗体库,并为我们的客户提供特性抗原的抗体筛选服务。值得指出的是, PCR引物合成中以及PCR反应中的错误造成的片段缺失或移码错误,是抗体库构建过程中一大困扰,而Creative Biolabs公司研发的结构内选择技术有效的解决了这一问题。